一滴一滴じっくりと

Hook2006-03-29

見守っていました
これ見てる仕事にだけは就きたくないですな


今日は培養した大腸菌からタンパク質のみを抽出する操作を
今回、大腸菌に作らせたタンパク質はペリプラズムという
部分に発生するものなので
まずはスクロースによる浸透圧ショックで細胞壁を破砕
その後、遠心機で菌を分離し、タンパク質を含む上澄みを集め
吸引ろ過を行ない、比較的大きな不純物を取り除く
そして、画像の陽イオン交換クロマトグラフィーの出番
負電荷に帯電した担体が詰まっていて
それにタンパク質溶液を流すと
電荷をもった目的タンパク質が電気的相互作用により結合
目的タンパク質以外は流れ落ちるという仕組み
その後、さらに電気的な結合力の強い溶液を流すことにより
結合していたタンパク質が置換され
タンパク質のみが得られるわけ


今日やってたこと詳しく書いてみた
きっとほとんど読まれないような・・・
つまりは純度の高い目的タンパク質を得ようとしてるわけ
そのためにいろんな方法でろ過してるわけ
ろ過ってけっこう時間がかかって
ほとんど待ち時間
200mℓのタンパク質溶液を陽イオン交換クロマトグラフィーに流すと
2時間はかかった
ほんと一滴一滴、ぽたぽたと落ちる程度で


夜は家庭教師
今日はお給料の日です
ついにお金、間違えずに所定の額いただけました
そしたら、来月から学習時間短くしてくれとのこと
いままで90分やってたの60分にしてくれと
・・・もしかして最初からそのつもりでお金くれてたんでしょうか?